Legyen a Schizophyllum Commune -val: Hozzon létre steril kultúrát a talált gombákból: 3 lépés (képekkel)

2024 Szerző: John Day | [email protected]. Utoljára módosítva: 2024-01-30 09:43

Ez az utasítás arra összpontosít, hogy elmagyarázza, hogyan lehet a Schizophyllum Commune gomba (közös neve Split Gill gomba) steril kultúráját Petri -csészén megtalálni a talált gombák segítségével. A Schizophyllum Commune -nak több mint 28 000 neme van, az Antarktisz kivételével minden kontinensen megtalálható, és képes (mint a többi "fehér és barna rothadásgomba") csökkenteni az endokrin rendszert károsító szennyezést (műanyagok, hormonokat utánzó ipari petrolkémiai anyagok, mint pl. az Atrazine műtrágya, a Bisphenol-A lágyítószer vagy a Diethylstilbestrol szintetikus hormon).

Megvizsgálom a vadgomba -azonosítási technikákat, hogyan készítek tápanyag -agar Petri -csészét, és hogyan használhatod fel a talált gombákat a steril izolált tenyészet termesztésére a Petri -csészében. Ebben a sorozatban más oktatható anyagok olyan technikákon mennek keresztül, mint a gomba genetikai azonosítása, egyszerű enzimatikus tesztek a gomba műanyag lebontásának és a hormonok utánzó szennyezésének tesztelésére, valamint az, hogy hogyan lehet sajtot készíteni az S. Commune -val.

Ez a projekt Mary Maggic, Paula Pin és jómagam közös munkájából jött létre a HANGAR rezidenciája alatt, Barcelonában, Spanyolországban, 2018. szeptemberben. További információ a projektről: ~~ 1 az oktatóanyagért:)

A képek a Schizophyllum Commune Fanzine -ból származnak ~ fájlok ingyenesen letölthetők innen

A rezidencia alatt három fő célunk volt:

1 ~ A Schizophyllum Commune és annak különféle kölcsönhatásai a hormonokkal és az endokrin rendszert károsító petrolkémiai szennyező anyagokkal. Az S. Commune egyike a sok "fehér és barna rothadás" gombának, amelyek képesek lebontani a hormonális és az endokrin rendszert károsító szennyezést. Ezek a gombák úgy táplálkoznak a fákról, hogy "lignocellulóz" enzimeket választanak ki a hálózatba kapcsolt testükből vagy a "micéliumokból", és az enzimek képesek lebontani a fák cellulózját és ligninjét. A cellulóz, a lignin és az EDS / hormonok, például az Atrazin, a BPA, az ösztradiol, a dietil -sztilbestrol és a nonil -fenolok szerkezeti hasonlóságai miatt a gombák által kiválasztott "lignocellulóz" enzimek sokféle mérgező anyagot is lebonthatnak. Ezenkívül az S. Commune immunstimuláló poliszacharidokat állít elő, amelyek rákmegelőzőként és kezelésként hasznosak (Japánban jóváhagyták a méhnyakrák kezelésére), erjesztéssel javíthatják bizonyos növények fitoösztrogén tulajdonságait, felhasználhatók az oltóanyag és a lactobacilius helyett sajtkészítési folyamatokat, és trombinrög -oldó enzimeket termelnek (hasznosak trombózis kezelésében). Furcsa módon ugyanazokat a "béta-glükánokat", amelyeket forrásban lévő vízzel lehet kivonni rákkezelésként és immunstimuláló szerekként, a kőolajipar is felhasználja az olajhozam növelésére, és az S. Commune-t bizarr visszacsatolási körben köti össze az endokrin rendszert károsító anyagokkal. petrolkémiai anyagokat képes lebontani és helyreállítani.

2 ~ Készítsen DIY és DIWO (másokkal együtt) protokollokat, amelyek egyszerűsítik ezeket a címzetteket az EDC -kkel és gombákkal való együttműködéshez, hogy a kodifikált tudományos ismereteket jobban hozzáférhető nyelvre fordítsák le. Használja ezeket a címzetteket oktatáshoz, megkérdőjelezéshez, a molekuláris gyarmatosítással szembeni ellenálláshoz, és új narratívák létrehozásához a többféle faj kialakulásáról és kollektív mutagenezisünkről.

3 ~ Kihívás az uralkodó ciszteronormatív, queerphobikus beszéddel kapcsolatban, amely az endokrin rendszert károsító vegyi anyagokról (EDC) szól. Hogy idézzem Malin Ah-King és Eva Hayward ösztöndíját a témákban: "Sok sajtóorgánum számol be ezekről a rémisztő endokrin mesékről a háztáji udvarunkról. Annak érdekében, hogy előtérbe helyezzük ezeket a kérdéseket-amint azt a következő médiában leírjuk-egy Frankenstein-féle metamorfózist mutatott be ami veszélyezteti a szexet és a szexualitást. Ahelyett, hogy foglalkozna a toxikus expozícióval járó számos más egészségügyi kockázattal, a legszenzációsabb és legvitatikusabb kérdések vitát és kritikus választ jelentenek. Kérdéseket vet fel: Miért a szex központibb, mint a rák, az autoimmun betegség, és még a halál is? Milyen kulturális idegek (amelyek közül sokan globalizálódnak) váltanak ki? És a feminista aggodalommal rendelkezők számára hogyan tudjuk átirányítani a vitát az esszencializmus, a szexizmus és a heteronormativitás elől? " (Mérgező nemek).

A Schizophyllum Commune egyedülálló "fehér rothadásgomba", mivel több mint 28 000 genetikai nemet találtak benne. Ez az alkalmazkodás - sokan elméletek szerint - lehetővé tették e faj hihetetlen genetikai sokféleségét, amely az Antarktisz kivételével a világ minden kontinensén megtalálható. Ennek a szervezetnek a gyönyörű szexuális sokféleségét akartuk ünnepelni, mint a biológia furcsaságainak egyik példáját. Az EDC-ket körülvevő domináns beszéd a médiában, és még a környezetvédő aktivisták részéről is nagy hangsúlyt fektet a tudománytalan elbeszélésekre, miszerint ezek a molekulák bizonyos szexualitásokat vagy nemeket okoznak, amelyeket társadalmunk patologizál, nem normatívnak titulál, és gyakran igyekszik kiküszöbölni vagy elkerülni. Nem csak a szexuális pánikba esett, furcsa fóbiás közvélemény-felháborodás az EDC tudományosan irreális témája (a hormonok és az endokrin rendszert károsító tényezők nem teszik furcsává vagy transzvá az embereket), hanem figyelmen kívül hagyja az EDC-hez köthető pusztítóan valós hatásokat: pajzsmirigy rendellenességek, bizonyos rákos megbetegedések, egyéb egészségügyi kockázatok mellett.

1. lépés: Keresse meg a közösségében élő Schizophyllum Commune -t

A Schizophyllum Commune laboratóriumi minőségű steril tenyészetét 350 dollárért lehet megvásárolni egy mikrobiológiai tenyésztési banktól, például az ATCC -től… ezért választottuk a vadon termő gombákból történő ingyenes tenyésztést:)

Könnyű dolgom volt, mert olvastam a Schizophyllum Commune -ról, és egyszer csak észrevettem, hogy a lakásom előtti fán nő. Ha nem vagy olyan szerencsés, hogy véletlenül rábukkansz S. Commune -ra a szomszédságodban, akkor érdemes elmenned egy erdős területre, hogy megkeresd a "konzolos" gombákat, amelyek a beteges keményfákon nőnek. túl jól) vagy kidőlt fák. Az S. Commune az egyik leggyakoribb gomba a világon, és alapvetően bárhol megtalálható, ahol keményfa nő.

A Mushroomobserver.org részletes leírást nyújt arról, hogy hol és mikor találja meg az S. Commune -t, valamint hogyan azonosíthatja azt, és hogyan kerülheti el a "hasonlít" megjelenést, amely téves azonosításhoz vezethet:

"AZONOSÍTÁS: A Schizophyllum commune könnyen azonosítható hasított kopoltyúi, sűrű haja és legyező alakú sapkája alapján. A sapka 1-4,5 cm széles, általában héj vagy legyező alakú, szürke vagy fehéres felületű. A basidiospórák 5-7,5 × 2 -3 mikrométer. A "Crimped Gill" Plicaturopsis crispa néven ismert hasonló gomba nem olyan széles körben elterjedt.

SZERZŐDÉS: A Schizophyllum commune keményfán nő, a lignint lebontó enzimek segítségével, és „fehér rothadást” okoz. Tehát a legtöbb fás területen megtalálható. Egész évben megtalálható, mivel képes kiszáradni, jobb körülmények között rehidratálni, majd tovább sporulálni.

Ez a gomba élősködhet a kis átmérőjű fákon, amelyek más tényezők, például aszály okozta stressznek vannak kitéve.

NÉZZ Hasonlóan: A Plicaturopsis crispa vagy a „Crimped Gill” hasonló a Split Gill -hez. Héj/legyező alakú termőtesttel is rendelkezik. A kupak azonban vörösesbarna vagy sárgásbarna, az alsó pedig nagyon jellegzetes. Görcsös erei vannak, mint a kopoltyúk, amelyek sokban különböznek a Schizophyllum commune hasított kopoltyúitól. A Crimped Gill kevésbé gyakori, de megkülönböztető, ha megtalálják."

2. lépés: Készítsen tápanyag agar lemezeket az S. Commune számára, hogy tovább növekedhessen

Az S. Commune kultúrájának izolálásához szüksége lesz néhány Petri -csészére, amelyek tele vannak gombával. Malátakivonat Az agar egy egyszerűen elkészíthető étel az S. Commune számára, vagy "táptalaj", amely könnyen hozzáférhető összetevőkből készíthető. Szintén jó táplálékforrás, ha enzimatikus vizsgálati kísérleteket végeznek S. Commune -nal és más fehér vagy barna rothadásgombákkal.

OLDALI MEGJEGYZÉS: Ha problémái adódtak az S. Commune megtalálásával, akkor sok más gomba található ugyanabban a családban, amelyeket ugyanazokkal a folyamatokkal lehet tenyészteni, és ugyanolyan jók, ha nem jobban lebontják az endokrin rendszert károsító szennyező anyagokat. A Turkey Tail (Trametes Versicolor) számos tanulmányban kiderült, hogy több száz fehér és barna rothadó gombát vizsgáltak a petrolkémiai szennyezést rontó "lignocellulóz" enzimek legnagyobb termelőjeként. A laskagomba is nagyon jó ebben.

Mikrobiológiai munkámat a BUGSS (Baltimore Underground Science Space) nevű közösségi biológiai laboratóriumban végzem, ahol hozzáférhetek üvegárukhoz, digitális mérlegekhez, mérőhengerekhez, autoklávhoz (a média hő- és nyomássterilizálásához) stb. az elmúlt évtizedben szerte a világon megjelent, ezért érdemes megnézni ezt a listát, hátha van ilyen a közelben. Ha nincs ilyen nagyszerű közösségi laboratóriuma a környéken, akkor be kell fektetnie néhány alapvető eszközbe ehhez a folyamathoz, például:

1 ~ Digitális mérleg az összetevők pontos méréséhez

2 ~ Nagynyomású tűzhely a média hővel és gőzzel történő sterilizálásához

3 ~ Petri-csészék, olcsón vásárolhatók az interneten, az újrafelhasználható üveg vagy eldobható műanyag működni fog, de az újrahasználható mindig jobb:)

4 ~ Néhány üvegáru az összetevők keveréséhez, sterilizálásához és tárolásához.

Ha nem szeretne befektetni ebbe a berendezésbe, akkor az előre öntött malátakivonat-agar lemezeket megvásárolhatja olyan webhelyeken, mint az Amazon, ~ hosszú távon csak drágább lesz, ha folytatja a mikrobiológiai munkát.

Már számos nagyszerű útmutató és youtube videó található arról, hogyan készíthet saját tápanyagot tartalmazó Petri -ételeket otthon. Tehát ahelyett, hogy részletesen belemennék ebbe, csak linkelni fogok egy párat - és megadom a 2% malátakivonat agar receptjét, amely az Ön által használt táptalaj.

Freshcap gomba: Útmutató otthoni gombatermesztéshez agartányérok készítéséhez

Mykoweb: Első lépések a gombatermesztéssel

Malátakivonat agar műszaki adatlap

2% malátakivonat agar (MEA) ~ ~ Recept 1 literre:

20 g malátakivonat (általános sörkészítő, online vásárolható)

15 g agar (szilárdítószer - gyakran használják főzéshez, így online vagy egyes élelmiszerboltokban is megvásárolható)

1 liter H20 (általában fordított ozmózisos vizet használok, amelyet a legtöbb élelmiszerboltban vásárolhat gallon kannákban)

Ez a recept könnyen módosítható, ha kisebb mennyiségeket szeretne készíteni. Például gyakran csak 250 ml -t készítek egyszerre, így végül csak 5 gramm malátakivonatot, 3,75 gramm agart és 250 ml vizet használok.

3. lépés: Inokulálja Petri -edényét gombákkal

A látott gombát „termőtestnek” nevezik, ez csak egy kis része a szervezetnek. Testének nagy része a fában (vagy a talajban) van elrejtve, és elfogyasztja a fát. A gomba ezen részét micéliumnak nevezik. A Schizophyllum Commune fehér rostos, csápszerű, rizómás, micélium testének Petri -csészére történő tenyésztéséhez mintát vesz a szárból, sterilizálja és a MEA -tányérokra helyezi. A micélium a sterilizált gomba szármintájából nő, és megtelepíti a Petri -csészét, úgy néz ki, mint egy fehér pamutszőnyeg.

Szükséged lesz:

• A malátakivonat agar (MEA) lemezeket, amelyeket az előző lépésben készített
• 70% izopropil -alkohol (dörzsölő alkohol) és spray -palack
• Papírtörlő
• Szike, vagy csak rozsdamentes acél borotva - dobozvágó fog működni
• fém csipesz
• kesztyű
• Láng - Alkohaul lámpát használok a műszerek sterilizálására, a NonDisjunction remek oktatóanyaggal rendelkezik az elkészítéséről.
• Steril felület vágásra (én csak steril Petri -csészét használtam ehhez)
• Parafilm, paraffin fólia, amelyet Petri -csészék lezárására használnak - maszkolószalagot is használhat, ha nincs ilyen

STERIL TECHNIKA:

A legfontosabb dolog, amit szem előtt kell tartani, amikor steril technikát próbál használni, hogy a baktériumok és a spórák folyamatosan hullnak a levegőbe, ezért szeretné, hogy a Petri -csészék a lehető legnagyobb mértékben le legyenek fedve. Amikor felemeli a fedeleket, hogy médiát öntsön, vagy oltást végezzen, mindig a legjobb, ha a fedelet közvetlenül az edény fölött tartja, így vízszintesen hozzáférhet a belsejéhez, de tartsa a fedelet az edény felett, hogy megakadályozza a baktériumok beesését. emberi, bakteriális, gombás és más organizmusok óriási konglomerátuma ~ ~ bár nem látod, de sűrű mikrobák felhője vesz körül, amelyek eloszlanak a testedből. Ahelyett, hogy csak a bőrének felületén ülne, a mikrobiomja a levegőbe nyúlik ~ ~ szaaoooooo, soha ne lendítse a kezét a Petri-csésze fölé, és ne hajoljon a nyitott edény fölé, hogy belenézhessen. És viseljen kesztyűt megvannak;)

Állítsa be a FÉL-STERIL MUNKATERET

Válasszon egy nem porózus munkafelületet, amely mentes a törmeléktől és a szeméttől. Permetezze le a területet 70% -os izopropil -alkoholos oldatával, és törölje le papírtörlővel. Helyezze lángját a munkaterület közepére, és gyújtsa meg. A lehető legközelebb kell dolgoznia a lánghoz, mert kis steril mezőt hoz létre körülötte. Helyezze a MEA tányérokat az egyik oldalra, a gombamintát pedig egy steril vágófelületre a másik oldalon. Általában steril Petri -csészét használok steril vágófelületként, valamint szerszámtámaszként. Öntsön izopropil -alkoholt egy kis pohárba - ezzel sterilizálja a pengét és a csipeszt munka közben.

*¡~ Beoltani ~!*

Mielőtt bármit tenne, sterilizálja a pengét és a csipeszeket úgy, hogy belemártja őket az izopropil -alch -ba, majd egy ideig a láng felett tartja. Sterilizálás után pihentesse őket a steril vágófelületén, ha letette. A csipesz segítségével tartsa mozdulatlanul a gomba szárát, és vágjon le egy darabot a végéről. Fogja meg ezt a darabot, és vágja le az összes oldalát úgy, hogy végül egy kis kocka gomba szármagot kapjon, és távolítsa el az összes külső felületet. Ez segít megszabadulni a gombán élő összes többi mikrobától, hogy ne szennyezzék a kultúráját. Ezután mártsa a szár magját az izopropilba körülbelül 30 másodpercig, húzza ki, és hagyja megszáradni a láng steril mezőjében (ne használja a lángot a szárításához, ez megöli a gombát). Ismét lánggal sterilizálja a csipeszét, amíg megvárja, amíg a szár magja megszárad. Ezután egyszerűen emelje fel az egyik MEA lemez fedelét annyira, hogy a csipeszeket oldalról be tudja csúsztatni, és a steril csipesszel helyezze a szármagot a lemez közepére. Zárja le a lemezt parafilmmel, és a következő hetekben látni fogja, hogy az S. Commune micélium kolonizálja a lemezt.

Általában több tányért készítek, amikor vad mintákkal dolgozom, hogy ha mégis szennyeződést kapnék, nagyobb valószínűséggel lenne legalább egy tiszta tenyészetem.